高效液相色譜法的應用范圍十分廣泛，對樣品的適用性廣，不受分析對象揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制，幾乎所有的化合物包括高沸點、極性、離子型化合物和大分子物質均可用高效液相色譜法分析測定，因而彌補了氣相色譜法的不足。下面講講流動相和過濾器在高效液相色譜中的作用：
1、流動相
流動相就比如人體的血液，其質量直接影響到整個系統(tǒng)的正常運行與否。
應該使用HPLC級的溶劑，不能互相混溶的溶劑不可以直接切換！一般在水相和與其不混溶的溶劑切換時，使用異丙醇作為過渡溶劑。
注意溶劑的截止波長。截止波長是指該溶劑可以在紫外檢測器中使用的低波長,低于該波長后,溶劑會有很強的紫外吸收，從而影響極限的穩(wěn)定性、干擾對所分析物質的檢測。
HPLC所使用的水必須是新鮮的和經(jīng)過0.45μm濾膜過濾過的。建議每天更換新鮮的水。長期不用時，必須把使用水的管路用有機溶劑置換，防止長霉。
儀器使用完后要采用適當?shù)娜軇_洗等方法維護色譜柱和系統(tǒng)。如果使用了緩沖鹽一定先將鹽要沖洗干凈。
儀器長期不用時，不建議使用純乙腈封存。因為乙腈有生成聚合物的趨勢。建議使用甲醇、甲醇/水或乙腈/水封存。
當有流路堵塞時，可以嘗試將之反接后沖洗。污染的溶劑或溶劑瓶里的藻類生長將會縮短溶劑過濾器的使用壽命，并且影響泵和系統(tǒng)的的性能。這在水溶劑或磷酸鹽緩沖液(pH4至7)中尤其如此。
2、過濾器
檢查溶劑過濾器
查看過濾器是否變色(尤其是盛放水相的溶劑瓶)–擰開脫氣機出口或比例閥入口管線，此時溶劑會因為重力流出。當脫氣機或溶劑過濾頭堵塞時，溶劑會流出不暢或不流出–臨時取下過濾器，檢查柱前壓力是否正常。
清潔溶劑過濾器
將堵塞的溶劑過濾器從瓶頭組件中拿下，用水沖洗殘留之溶劑，然后將過濾器放在裝有濃硝酸(35％左右)的燒杯里浸一小時。用二次蒸餾水*沖洗過濾器至水為中性可以把過濾器放在塑料燒杯內(nèi)超聲清洗。但是不可使用玻璃器皿將過濾器重新裝好。
建議：定期清洗溶劑過濾器及溶劑瓶（可以高溫滅菌），每三個月至少清洗一次。
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